ELISA方法實(shí)驗(yàn)常會出現(xiàn)一些結(jié)果不好的現(xiàn)象，深圳子科生物技術(shù)部總結(jié)了常見的幾大類問題和對應(yīng)的解決方案，具體如下：
一、ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯色淡、 靈敏度偏低
可能原因與具體解決辦法如下：
1、試劑盒在運(yùn)輸途中時間太長，溫度太高
解決辦法：盡量縮短運(yùn)輸時間，夏季應(yīng)放冰塊降溫

2、試劑盒未充分平衡
解決辦法：試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開盒蓋，于室溫平衡至少
20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫（約25℃） 。

3、培養(yǎng)箱溫度不足37℃
解決辦法：注意培養(yǎng)箱溫度，放入反應(yīng)板后盡量減少開啟次數(shù)以免
影響溫度恒定，非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意

4、保溫時間不足
解決辦法：校正定時鐘準(zhǔn)確定時

5、洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數(shù)增加
解決辦法：按說明書要求保留洗滌時間，準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù)

6、移液器吸液量不足，吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔
解決辦法：校正移液器，吸嘴要配套，裝吸嘴時要緊密，吸嘴內(nèi)壁
要清潔，最好一次性使用

7、蒸餾水水質(zhì)有問題
解決辦法：使用新鮮合格的蒸餾水

8、底物作用時間不足
解決辦法：準(zhǔn)確定時

二、背景深全部呈有色
可能原因與具體解決辦法如下：

1、洗滌不充分，洗后未拍干，樣品中其它成分殘留或酶標(biāo)記物殘留
解決辦法：
濃縮洗液準(zhǔn)確配制；10倍濃縮洗滌液如有結(jié)晶則應(yīng)讓結(jié)晶于室溫全部溶解后再量取稀釋；充分洗滌，徹底拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應(yīng)棄去不用，不要反復(fù)使用，否則易造成污染

2、樣品污染
解決辦法：
樣品應(yīng)新鮮采集，或低溫保存，防止污染

3、培養(yǎng)箱溫度超過37℃或反應(yīng)時間過長
解決辦法：調(diào)整培養(yǎng)箱溫度，準(zhǔn)確定時

4、吸嘴重復(fù)使用，未洗凈或消毒不徹底
解決辦法：吸嘴盡可能一次性使用

5、蒸餾水被污染
解決辦法：使用新鮮蒸餾水

6、酶等試劑混用
解決辦法：不同批號試劑勿混用

7、一次實(shí)驗(yàn)的標(biāo)本量過多，加樣時間太長， 導(dǎo)致實(shí)際反應(yīng)時間延長
解決辦法：合理安排實(shí)驗(yàn)，避免幾塊酶標(biāo)板同時加樣

三、重復(fù)性不佳
1、樣品數(shù)量多少不一，加樣時間有長有短    
解決辦法：重復(fù)某一樣品時，加樣時間盡可能與第一次接近

2、保溫時間不一致，洗滌條件不一致，操作人員不一致
解決辦法：重復(fù)測定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持
一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性

3、加樣量不一致    
解決辦法： 樣品稀釋前應(yīng)充分混勻，盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴

四、出現(xiàn)白板陽性對照不顯色

1、顯色液變質(zhì)    
解決辦法：更換新的顯色液

2、洗滌液配制有誤  
解決辦法： 請按說明書所示稀釋倍數(shù)配制

3未加酶結(jié)合物而認(rèn)為已加入  
解決辦法： 注意不要漏加

4、終止液誤作洗滌液稀釋或當(dāng)?shù)孜镆菏褂?nbsp; 
解決辦法： 每次加液前均應(yīng)看清標(biāo)簽。

深圳子科生物專業(yè)研發(fā)生產(chǎn)ELISA試劑盒，如您購買我公司試劑盒后在實(shí)驗(yàn)過程中，遇到任何解決不了的問題，都可以隨時電話反饋到我們技術(shù)部，我們將第一時間幫您解決，助您售后無憂!