?飛克+皮克 ECL超敏發(fā)光液

貨號(hào)：ZK-PL4192?

規(guī)格：100ml?

描述：

ECL發(fā)光液可用于直接或間接檢測(cè)與辣根過(guò)氧化物酶HRP關(guān)聯(lián)的蛋白或核酸底物。普利萊是國(guó)內(nèi)最早推出ECL化學(xué)發(fā)光液的民族品牌，使用普利萊ECL化學(xué)發(fā)光產(chǎn)品發(fā)表的SCI論文文章影響因子超過(guò)5000分。經(jīng)過(guò)不斷研發(fā)升級(jí)，普利萊目前擁有中、強(qiáng)、極強(qiáng)全系列發(fā)光液，與國(guó)外進(jìn)口品牌相比，品質(zhì)好，價(jià)格優(yōu)，不論高豐度蛋白、低豐度蛋白，總有一款適合您！

用途：

適于全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)和HRP標(biāo)記探針的核酸雜交。

安全性：

無(wú)特殊毒性，按普通化學(xué)品處理。

使用方法:

1. 常規(guī)電泳、轉(zhuǎn)膜、HRP標(biāo)記抗體或核酸探針?lè)跤?、洗膜。注意用HRP標(biāo)記lgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾法。核酸雜交膜用HRP標(biāo)記探針雜交，洗膜。

2. 洗滌膜上的HRP標(biāo)記二抗時(shí)，配制新鮮發(fā)光工作液：分別取等體積的溶液A和B混合，放置使之升到室溫。建議立即使用工作液，室溫放置數(shù)小時(shí)后仍可使用但靈敏度略有降

低。

3. 用鑷子取出膜，搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜完全干燥。將膜完全浸入并與發(fā)光工作液(0.125ml發(fā)光工作液/cm2膜)充分接觸。準(zhǔn)備立即使用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)掃

描。孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)不會(huì)增加靈敏度，有時(shí)還會(huì)導(dǎo)致曝光條帶異常。發(fā)光過(guò)程的本質(zhì)是酶促反應(yīng)，使用過(guò)少的發(fā)光工作液不利于反應(yīng)進(jìn)行，也會(huì)導(dǎo)致膜上條帶曝光不均，明顯降

低靈敏度。為達(dá)節(jié)約目的可將膜剪小但勿降低發(fā)光液用量。

4. 用鑷子夾起膜，搭在濾紙上瀝干發(fā)光工作液。但勿洗去發(fā)光液。

5. 全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。

注意事項(xiàng)：

1. 步驟1-5可在日光燈下操作；但發(fā)光液曝露于強(qiáng)光下時(shí)間過(guò)久靈敏度可能略有降低。戴手套可以避免在膜上留下手印。

2. 蛋白過(guò)量，將加深背景并使條帶強(qiáng)弱變化失去線(xiàn)性關(guān)系。

3. 發(fā)光工作液孵育約1分鐘后膜上的條帶發(fā)光。強(qiáng)條帶發(fā)光在暗房中肉眼可見(jiàn)，低豐度蛋白條帶發(fā)光較弱甚至肉眼不可見(jiàn)但可全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。如果曝光后條帶

不佳，可用洗膜緩沖液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用ECL發(fā)光。

4. 由于不同發(fā)光液的靈敏度，選擇合適的抗體稀釋濃度，進(jìn)行孵育!

5. 某些市售保鮮膜包裹印跡膜時(shí)會(huì)淬滅熒光，應(yīng)選擇高質(zhì)量保鮮膜，例如“克林萊”牌子保鮮膜。

6. 暗室曝光時(shí)，使用肉眼可見(jiàn)的熒光-放射自顯影曝光標(biāo)簽(#P2010)可幫助確定膠片上條帶的準(zhǔn)確位置和大小。

7. NaN3能抑制HRP活性，回收第二抗體應(yīng)避免使用NaN3，如必需使用勿超過(guò)0.01%。

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